质粒转染技术原理

质粒转染是一种将外源性DNA（通常是质粒）引入到真核细胞中的实验技术，广泛应用于基因表达、基因功能研究、基因编辑等领域。质粒是细菌中常见的、环状的双链DNA分子，能够携带外源基因，通过转染的方式进入细胞并表达。这一技术被广泛应用于细胞生物学、分子生物学和基因治疗研究中。

质粒转染技术原理：
转染类型：根据不同的实验目的，外源DNA导入哺乳动物细胞又可分为瞬时转染和稳定转染。
瞬时转染一般是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合到染色体，在外源DNA导入细胞1—4天后收获转染细胞对转染基因的转录和复制进行分析。
而稳定转染则需要使外源基因整合于细胞染色体从而得到稳定的转染细胞株。实现细胞的稳定转染，通常需要一个抗生素筛选的过程。
除DEAE葡聚糖只能用于瞬时转染，其他方法均可用于瞬时转染和稳定转染。
质粒转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。

因为不同的细胞在生理代谢及分裂上均存在差异，因此研究者将外源遗传物质导入细胞的过程中需要选择不同的方式。目前，将外源物质导入细胞的方法主要分为三大类：
1.脂质体（或是脂质体替代物）转染；
2.电转；
3.病毒感染。
这三种方法互有优劣。脂质体或是脂质体替代物转染操作简便，价格低廉，但是对细胞毒性大。而且，有些细胞通过脂质体转染效率很低；电转操作方便快捷，但是需要专门的仪器，对细胞损伤也比较大；病毒感染克服了前两者的劣势，感染效率高，对细胞毒性小，但是病毒前期包装需要大量的时间和精力 。

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