SF9昆虫卵巢细胞

SF9昆虫卵巢细胞系是从草地贪夜蛾（Spodopterafrugiperda）卵巢组织分离建立的传代细胞系，以高效表达重组蛋白的能力为核心特征。与DogL1狗肺细胞系的肺功能模拟特性不同，其核心价值在于作为杆状病毒表达系统的宿主，实现重组蛋白的高水平可溶性表达，成为研究蛋白功能、疫苗研发及生物制药的关键工具。该细胞系的重组蛋白表达量可达300μg/mL（是哺乳动物细胞系的5-10倍），与DogL1细胞系形成“蛋白表达-生理功能研究"的功能互补体系，在分子生物学与生物技术领域具有重要意义。

一、细胞起源与生物学特性

来源与分离特征

SF9细胞系源自1983年研究者对草地贪夜蛾蛹卵巢组织进行yi酶消化，通过有限稀释法克隆获得的细胞系（“SF"代表Spodopterafrugiperda，“9"代表第9个克隆株）。该细胞系因杆状病毒敏感性高且蛋白表达稳定（＞95%），1985年被确立为杆状病毒表达系统的标准宿主，解决了早期昆虫细胞培养中病毒复制效率低、蛋白表达量不足的问题，成为重组蛋白生产的标gan模型。

形态与生长特征

细胞呈圆形或椭圆形上皮样形态，可同时适应贴壁与悬浮生长（贴壁时呈单层分布，悬浮时形成均一细胞团），与DogL1的立方状肺泡上皮形态显著不同，胞质内可见发达的内质网与高尔基体（占胞质体积的35%，与蛋白分泌功能相关），细胞核呈圆形（核质比约1:2.8，高于DogL1细胞）。在27℃无CO₂条件下（昆虫细胞te有培养环境），使用含10%胎牛血清的Grace's昆虫培养基，倍增时间约24-28小时（远短于DogL1细胞），悬浮培养密度可达1×10⁷细胞/mL（是贴壁培养的5倍），适合大规模悬浮发酵。连续传代200次后仍保持病毒敏感性与蛋白表达能力（活性下降＜5%），核型稳定（染色体数约28-32条，呈弥散型），无致瘤性，适合工业化生产应用。

功能特性

杆状病毒感染特性：对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（AcMNPV）等杆状病毒的易感率达100%，病毒复制周期约72小时（比哺乳动物细胞病毒复制快30%）；感染后48小时进入裂解期，释放病毒粒子达10⁸PFU/mL，同时启动重组蛋白的高效表达（表达量随病毒复制同步升高）。与DogL1细胞的天然病毒感染不同，其病毒受体为gp64蛋白（表达量是其他昆虫细胞的2.3倍），确保病毒高效入侵。

蛋白表达与修饰：具备完整的真核蛋白修饰系统，可实现糖基化、磷酸化等翻译后修饰（糖基化效率达哺乳动物细胞的70%），但糖链结构更简单（以高甘露糖型为主）；表达的重组蛋白可溶性率达85%（高于大肠杆菌的30%），且正确折叠率达90%（通过圆二色谱验证），尤其适合膜蛋白与复杂结构蛋白的表达（如G蛋白偶联受体）。

代谢适应性：在无血清培养基中可正常生长（细胞密度达8×10⁶细胞/mL），代谢葡萄糖的速率达5.2mmol/10⁹细胞/天，乳酸积累量仅为哺乳动物细胞的1/5，适合高密度发酵（z高密度可达3×10⁷细胞/mL）；对氧气浓度变化敏感，溶氧维持在30-50%时蛋白表达量z高（低于20%时下降40%）。

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