工作原理
微分干涉显微镜基于干涉现象原理,通过分离入射光并使其通过样本中的不同部分,从而产生干涉信号,增强对比度。与常规明场显微镜不同,微分干涉显微镜使用两个偏振光的光束,它们会在通过样本时相遇并相互干涉,产生具有高度对比的图像。
具体过程:
1.偏振光源:光源发出的光s先通过偏振片,被转换成偏振光。
2.分束:光通过分束器(又称为Nomarski干涉板),被分成两束偏振光。
3.样本照明:这两束偏振光分别通过样本的不同路径。由于样本不同部分的折射率不同,这两束光在通过样本时会发生相位变化。
4.干涉:两束光在通过样本后,经过另一分束器重新汇聚。由于它们的相位不同,会发生干涉,从而产生强烈的对比效应。z终形成一个具有高对比度的图像,能够显示细胞的内部结构和其他细微特征。
微分干涉显微镜特点与优势
1.高对比度:微分干涉显微镜能够显著提高透明样本的对比度,尤其是对于未染色的细胞或组织。通过对折射率差异的敏感反应,可以观察到一些细微的结构,通常是常规明场显微镜无法提供的细节。
2.无染色要求:与其他显微技术(如荧光显微镜或染色显微镜)不同,微分干涉显微镜不需要用染料或化学试剂处理样本。它能够清晰显示透明或未染色的样本,这对于活细胞观察尤其重要,因为染色可能会影响细胞状态。
3.活细胞成像:微分干涉显微镜非常适合进行活细胞成像,因为它不会影响样本的生物学功能。通过这种显微镜技术,可以观察到活细胞的动态变化,如细胞分裂、细胞运动等过程。
4.高分辨率:微分干涉显微镜可以提供比明场显微镜更高的分辨率,特别是在细胞和细胞内结构的观察中。
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