抗原ELISA试剂盒,全称为酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked Immunosorbent Assay)试剂盒,是一种用于检测抗原的灵敏、特异的生物分析技术。基本原理是将抗原与酶结合,形成酶标抗原。当酶标抗原与样本中的相应抗体结合后,形成抗原-抗体-酶复合物。这种复合物能催化底物反应,产生颜色变化。通过颜色变化的程度,可以半定量或定量地检测样本中的抗原。
抗原ELISA试剂盒的操作步骤通常包括:
准备:将试剂盒和样本恢复至室温,并按照说明书进行稀释和加样。
加样:将标准品和样本依次加入微孔板中,每个样本通常设置复孔以提高准确性。
温育:在适当的温度和时间内进行温育,使抗原与抗体充分结合。
洗涤:用洗涤液彻d 洗涤微孔板,去除未结合的物质。
加酶标抗原:加入酶标抗原,使其与已结合的抗体反应。
再次温育和洗涤:进行第二次温育和洗涤步骤。
显色:加入底物溶液,在酶的催化下使底物显色。
终止反应:加入终止液终止颜色反应。
测定:用酶标仪在特定波长下测定吸光度值(OD值),并根据标准曲线计算样本中抗原的浓度。
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