线粒体绿色荧光探针的使用方法

线粒体绿色荧光探针，如Mito-Tracker Green或MitoTracker Green FM，是一种常用于生物医学研究中的工具，主要用于活细胞线粒体的特异性荧光染色。

一、产品特点
1.细胞膜渗透性：线粒体绿色荧光探针具有细胞膜渗透性，能够轻松进入细胞内部。
2.特异性染色：探针在线粒体内特异性富集，并发出绿色荧光，实现对线粒体的精准标记。
3.不依赖于线粒体膜电位：与某些传统探针不同，线粒体绿色荧光探针对于线粒体的染色不依赖于线粒体膜电位，因此在多种实验条件下均能保持稳定的染色效果。

二、光谱特性
1.激发波长：通常为490nm左右（具体可能因不同产品略有差异）。
2.发射波长：在516nm至523nm之间（具体取决于产品型号和实验条件）。

三、使用方法
1.溶解与储存：
（1）探针通常以粉末形式提供，使用前需用细胞培养级别的DMSO或其他适宜溶剂溶解至一定浓度（如1mM），并分装避光保存。
（2）储存条件一般为-20℃，避光，有效期可达2年。
2.细胞染色：
（1）将细胞与适当浓度的探针工作液（如20-200nM）孵育一定时间（如15-45分钟），使探针进入细胞并富集于线粒体。
（2）染色结束后，更换新鲜预热的培养基或缓冲液，以去除未结合的探针。
3.观察与分析：
（1）使用荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪等设备观察细胞，记录线粒体的绿色荧光信号。

四、注意事项
1.探针浓度和工作液体积应根据实验需求和细胞类型进行调整。
2.染色后应尽快进行观察和分析，避免荧光信号减弱或消退。
3.探针不适用于醛类固定液固定后的细胞和组织，因为固定会导致荧光信号丢失。

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