犬elisa检测试剂盒的操作流程

犬elisa检测试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被犬免疫球蛋白E(IgE)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在Peroxidase的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的犬免疫球蛋白E(IgE)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

犬elisa检测试剂盒操作流程：
1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3、样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根Peroxidase(HRP)标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7、每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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