兽药残留

兽药残留
所用仪器、试剂
具备的仪器：酶标仪、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）、氮吹仪、恒温箱微量移液器：单道20～200µl、单道100～1000µl、多道30～300µl
试剂：乙腈、二氯甲烷、无水硫酸钠、正己烷
五、样本前处理步骤
样本处理前须知
（a）实验中必须使用一次性吸头，吸取不同试剂时要更换吸头。
（b）实验之前须检查各种实验器具是否干净，必要时可对实验器具进行清洁，以避免污染干扰实验结果。
样本前处理需配制：配液1样品提取液乙腈-二氯甲烷混合溶液：
V乙腈-V二氯甲烷=4:1，取40ml乙腈，再加入10ml二氯甲烷，混匀后使用。
配液2样品复溶液
将4X浓缩复溶液用去离子水按1：3稀释（1份4×浓缩复溶液+3份去离子水），或按所需用量配制。
样本处理：
（a）水样处理方法
取50µl清澈水样样直接测定（如果水样浑浊一定要过滤或4000r/min离心10min，直至得到清澈样），暂不使用的样本应冷冻保存。
样本稀释倍数:1倍
（b）水产品处理方法
1、称取2±0.05g均质组织样品于50ml离心管中，加入6ml样品提取液（配液1），2g无水硫酸钠，振荡5min，室温（25℃左右）4000r/min以上离心10min；
2、取3ml上清液，加入20µl氧化剂，摇匀，在56℃条件下氮气或空气流吹至*干燥；
3、加入1ml正己烷，加入1ml样品复溶液（配液2），振荡摇匀1min，4000r/min以上离心5min；
4、取下层50µl用于分析；
样本稀释倍数:1倍
注：此方法所得到的结果为孔雀石绿；隐性孔雀石绿；结晶紫；隐性结晶紫的总量。
六、酶标免疫分析程序:
测定前应须知：
1、使用前将需用试剂和板条的温度回升至室温（20～25℃）。
2、使用之后立即将所有试剂放回2～8℃。
3、在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的*性，正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。
4、所有恒温孵育过程，避免光线照射，用盖板膜盖住微孔板。
操作步骤：
1、从2～8℃冷藏环境中取出所需试剂，室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出框架及需要数量的微孔，将不用的微孔放入自封袋，保存于2-8℃。
3、配液1：将40ml浓缩洗涤液（20倍浓缩）用去离子水按照1：19稀释（1份浓缩洗涤液+19份去离子水），或按所需用量配制洗涤液。
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