冰冻切片Kat1抗原免疫组化染色试剂盒的操作步骤

　　冰冻切片Kat1抗原免疫组化染色试剂盒的原理很简单，苏木素染色法也是常用的一种染色方法。木素染色后的细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。染色液也可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。
冰冻切片Kat1抗原免疫组化染色试剂盒的操作步骤：
1、准备：从冰箱取出小鼠核因子κB受体活化因子配基试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
9、显色：每孔先加入显色剂A液50μL，再加入显色剂B液50μL，平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s)，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。
12、冰冻切片Kat1抗原免疫组化染色试剂盒计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算，zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
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