细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。细胞的生长需要营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基。培养基按其物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
细胞培养是指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境等特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长。细胞培养现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域。
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二、过程介绍
细胞培养过程中,涉及到多个基本实验操作,例如:复苏、换液、传代、冻存等。
复苏
1.把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动(注意防止盖子不紧致使液体进入冻存管)。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2.把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。
3.把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。
4.标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到37℃的5%CO2培养箱中培养。
5.根据细胞增长速度2-3天换一次培养基。
换液(以贴壁细胞为例)
1.培养一段时间后,细胞还未长满,而细胞培养基颜色由红色逐渐变黄,说明培养基中营养物质不足,需要及时换液。
2.吸掉原有培养基。
3.加入等体积新的*培养基。
4.放到37℃的5%CO2培养箱中继续培养。
5.培养过程中,要定期观察细胞状态。如果细胞密度达到80%-90%需要准备传代。
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