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在做各项实验时离不开各式各样的溶液，其中缓冲剂较为多见，是实验中的必需品。而HEPES缓冲剂作为受青睐的溶液之一，它的效果也不容小觑，近些年它被广泛用于各大细胞实验中，是被大众认可的溶剂，但近期也有不少人质疑hepes对细胞有毒性作用。这究竟是不是事实呢？下面具体给大家分析一下。
一、HEPES缓冲剂的浓度
HEPES在37度的环境下pKa为7.3，而它可以以10mM-25mM的浓度添加到培养基中，从而达到额外的缓冲能力，如果浓度过低，一般无法控制调整PH值，但如果浓度较高就会产生毒性，所以在使用时需要特别注意浓度的多少。
二、选择HEPES缓冲剂的原因
因为在在整个培育过程中会产生代谢行为，从而导致整个环境PH值发生变化，如果想要保持稳定不变的环境，就需要向培养基中加入适量的缓冲液。市场上有很多缓冲液，为什么单单会选择HEPES呢？其实这和它的缓冲范围以及成分有关，PH范围恰好在6.8-8.2之间，这是培养的有效范围，且与其它缓冲液相比，它的稳定性更高。
三、使用HEPES对细胞的作用
其实使用HEPES对细胞是没有毒性作用的，它可以在一定时间内对PH值范围进行控制，且浓度在合理要求内是不存在毒副作用的，所以会被常用于各种细胞培养实验里，来维持所需要的环境。
此外，使用缓冲液会要求室温条件达到25度，或者根据实验要求需要更高的温度条件，而HEPES具有分解能力，可以跟随温度的变化而变化，这样不仅可以满足细胞培养环境温度要求，也能保证实验进程。
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