细胞间粘附分子1elisa试剂盒本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中aif水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入aif抗原、生物素化的抗小鼠aif抗体、hrp标记的亲和素,经过***洗涤后用底物tmb显色。tmb在***化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的aif呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(od值),计算样品浓度。简易原理示意图如下:
需要而未提供的试剂和器材:
1. 酶标仪(450nm)
2. ***加样器及头:0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒性能:
1. 灵敏度:小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数r值为0.990。
2. 特***:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
完整的elisa试剂盒主要的组成成份如下:
1、已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
2、c的抗原或抗体(结合物);
3、酶的底物;
4、阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
5、结合物及标本的稀释液;
6、洗涤液,在板式elisa中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
7、酶反应终止液,常用的hrp反应终止液为***,其浓度按加量及比色液的终体积而异,在板式elisa中一般采用2mol/l。
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