在此实验中,标准品、质控品和未知样品在包被了抗IGFBP-3单抗体的微孔板中温育。温育之后洗板,再加入辣根过氧酶标记的抗IGFBP-3抗体。二次温育后再洗板,再向微孔中加入TMB底物液。之后再加入酸性终止液,用双波长450nm和620nm检测底物的酶反应程度。
检测到的OD值直接与样品中IGFBP-3的浓度成正比。实验使用了一套IGFB-3标准品,用标准的OD值对IGFBP-3的浓度可做出一条标准曲线,之后质控品和未知样品中的IGFBP-3浓度就可以从此标准曲线上定量得到。
IGFBP-3 ELISA Kit标准品配置:
使用1ml的蒸馏水重溶标准品。使用稀释缓冲液作为零标准品。
IGFBP-3 ELISA Kit质控品配置:
使用1ml的蒸馏水重溶质控品。
IGFBP-3 ELISA Kit酶联物制备:
制备适当体积酶联物溶液,例如:100ul的20倍浓缩的酶联物加至2ml的酶联物缓冲液中。使用混合器混匀,建议临时制备。
洗涤液:
制备适当体积的即用型洗涤液,通过加入199份的蒸馏水至1份的200倍浓缩的洗涤液,使用一个电磁搅拌器混匀。
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