PIPES(哌嗪N,N`二(2 乙磺酸))是一种两性缓冲液,缓冲PH范围在 7.2 - 7.4,不溶于水,但可溶于氢氧化钠水溶液。 PIPES包含在Good’s缓冲液中,广泛应用于疫苗生产,组织培养、阳离子功效的研究、以及生物物质的分离技术等方面。
PIPES缓冲剂的基本介绍
PIPES与其它缓冲剂不同,例如:BIS-TRIS、BICINE,它和很多金属离子无法形成稳定的化合物,所以非常适用于作为金属离子溶液中的缓冲剂。
PIPES的pKa值有两个,分别为1pKa和2.67pKa,1pKa在环境温度处于25°C下为6.76,接近生理pH,缓冲范围在6.1-7.5,这就适用于细胞培养工作,2.67pKa在25°C下,缓冲范围为1.5-3.5。
PIPES可以应用在哪里
PIPES可应用于磷酸纤维素色谱纯化微管蛋白以及凝胶过滤法纯化重组GTP,结合蛋白ARF1和ARF2,作为缓冲液从大肠杆菌中结晶转酮酶。不过值得注意的是,由于PIPES可以形成自由基,并不适用于氧化还原体系。
PIPES缓冲剂的优势
1、动植物组织样品的戊二醛固定可导致脂质损失,有明显的形态变化,当使用PIPES缓冲戊二醛固定剂时,脂质损失和伪影z小化。
2、如果固定在伴草酸盐缓冲的戊二醛中进行超细胞化学固定时,有可能会选择性地丧失了碱性磷酸酶的活性。当使用PIPES作为缓冲液时,活性保留率会有明显提高。
3、戊二醛和甲醛在PIPES缓冲液中结合,荧光显微镜和电子显微镜的真菌游动孢子的固定能达到j佳。
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