核酸的提取分别为DNA提取和RNA提取,二者的提取原理大致相同,简单来说分为细胞或者组织的裂解和核酸纯化两大步骤。核酸提取纯化方法常用的有酚/氯仿抽提法、离心柱法、磁珠法等。
1.酚/氯仿抽提法
乙烯氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子,变性降解核蛋白,使DNA从核蛋白中游离出来。
2.离心柱纯化
离心柱结构主要是特殊硅基质吸附材料,能特异性吸附DNA,而RNA与蛋白质则会穿过。该方法能选择性地吸附核酸而不吸附蛋白质及盐,从而实现核酸与蛋白质及盐的分离,是目前试剂盒提取广泛使用的方法。
3.磁珠法
磁珠法是一种固相载体可逆化固定(SPRI)的分离纯化方法,主要原理为:在不同浓度的PEG中,会有不同片段大小的DNA吸附在磁珠wjdxaol的羧基修饰层上,这些DNA可以再溶解在水中,以此来洗脱回收。